Pullulanase

Pullulanase er et maltose-induserbar stivelse-avgrenende enzym fra Klebsiella pneumoniae. Sekresjonen er avhengig av produkter fra minst åtte sekresjonsgener som er lokalisert på begge sider av pullulanase-genet (pulA) i kromosomet til Klebsiella (Kornacker og Pugsley, 1990b). Pullulanase kan uttrykkes og utskilles i E. coli forutsatt samtidig ekspresjon av pullulanasesekresjonsgenene (d'Enfert et al., 1987). Proteinet eksisterer som et eksponert, celleoverflatebundet mellomprodukt før det frigjøres til mediet ved -start av den stasjonære vekstfasen (Michaelis et al., 1985). Eksport- og sekresjonsinformasjonen ser ut til å ligge i den N-terminale halvdelen av pullulanase (Kornacker og Pugsley, 1990a). Hybridproteiner der den C-terminale regionen av pullulanase hadde blitt erstattet med henholdsvis den modne -laktamasen og alkalisk fosfatase (PhoA), og dermed fusjonert til den første 832 N-terminalen aaen av pullulanase, ble vist å være kortvarig uttrykt} og utskilles{20} med utskillelse av genet{20} E. coli (Kornacker og Pugsley, 1990b). Selv om begge enzymene ble vist på overflaten, ble PhoA mindre effektivt eksponert, noe som kan skyldes inkompatible sekundære og tertiære strukturer av det heterologe passasjerproteinet.