Hva er nøytral protease?
Nøytral protease er en mild, raskt-virkende metalloprotease (vanligvis fra Bacillus polymyxa eller Bacillus subtilis) som fungerer optimalt ved pH 5,9–7,5 for å hydrolysere ikke-polare aminosyrerester. Den er mye brukt for celleisolering og vevsdissosiasjon, og skiller effektivt epidermis fra dermis samtidig som cellemembranintegriteten opprettholdes.
Alt du trenger å vite
Hva er nøytral protease?
Nøytral protease (Dispase) dissosierer fibroblastlignende-celler mer effektivt enn epitellignende-celler, så den har også blitt brukt til differensiell isolasjon og kulturapplikasjoner. Andre fordeler er dens ikke-pattedyrkilde (bakteriell) og dens evne til å bli hemmet av EDTA.
Hvem bør ikke ta protease?
Noen kan forårsake allergiske reaksjoner. Se spesifikke proteolytiske enzymer for mer detaljert sikkerhetsinformasjon. Graviditet og amming-: Det er ikke nok pålitelig informasjon til å vite om proteolytiske enzymer er trygge å bruke når du er gravid eller ammer. Vær på den sikre siden og unngå bruk.
Hva gjør protease med kroppen din?
Dermed regulerer proteaser skjebnen, lokaliseringen og aktiviteten til mange proteiner, modulerer protein-proteininteraksjoner, skaper nye bioaktive molekyler, bidrar til prosessering av cellulær informasjon og genererer, transduserer og forsterker molekylære signaler.
Hva er bivirkningene av protease?
Vanlige bivirkninger av proteasehemmere
Magesmerter.
Kvalme og oppkast.
Diaré.
Utslett.
Hoste.
Utmattelse.
Nyrestein.
Omfordeling av fett på kroppen din (lipodystrofi).
Hoveddetaljer:
Handling:Det er en amino-endopeptidase som bryter ned komponenter i den ekstracellulære matrisen (ECM), som fibronektin og kollagen IV, uten å skade selve cellene.
Cellekulturbruk:Svært foretrukket i primær cellekultur og vevsdissosiasjon fordi det gir en "skånsom" frigjøring av celler.
Vevsdissosiasjon:Ofte sammenkoblet med kollagenase for å forbedre effektiviteten av å frigjøre spesifikke celler, for eksempel hepatocytter eller bukspyttkjerteløyer.
Andre bruksområder:I tillegg til forskning, brukes nøytrale proteaser i næringsmiddelindustrien for mørning av kjøtt, bakeri og melkeprodukter (f.eks. osteproduksjon) på grunn av deres evne til å bryte ned proteiner og forbedre tekstur.
Hemmere:Dens aktivitet er avhengig av sink- og kalsiumioner og hemmes av EDTA eller EGTA.
Nøytral protease (Dispase) er et bakteriell enzym produsert av Bacillus polymyxa som hydrolyserer N-terminale peptidbindinger av ikke-polare aminosyrerester og er klassifisert som en amino-endopeptidase. Dens milde proteolytiske virkning gjør enzymet spesielt nyttig for isolering av primære og sekundære (subkultiverings) celler siden det opprettholder cellemembranintegriteten.
Nøytral protease (Dispase) brukes også ofte som et sekundært enzym i forbindelse med kollagenase og/eller andre proteaser i mange primære celleisolasjons- og vevsdissosiasjonsapplikasjoner. Nøytral protease (Dispase) dissosierer fibroblastlignende-celler mer effektivt enn epitellignende-celler, så den har også blitt brukt til differensiell isolasjon og kulturapplikasjoner. Andre fordeler er dens ikke-pattedyrkilde (bakteriell) og dens evne til å bli hemmet av EDTA.
ANALYTISKE RESULTATER
| Testelement | Metode / Ref. | Spesifikasjon | Resultat | Konklusjon |
|---|---|---|---|---|
| Identifikasjon | Intern--ID/etikettkrav | Nøytral protease (EC 3.4.24.24) | Samsvarer | Pass |
| Utseende | Visuell | Off-hvitt til lysegult pulver | Samsvarer | Pass |
| Enzymaktivitet | AOAC eller-intern analyse | NLT 1000 U/g | 1,200 U/g | Pass |
| pH (1 % løsning) | pH-meter | 6.0 – 8.0 | 6.5 | Pass |
| Fuktighet | Gravimetrisk / USP 731 | Mindre enn eller lik 6,0 % | 4.5% | Pass |
| Aske | Gravimetrisk / USP 281 | Mindre enn eller lik 5,0 % | 3.2% | Pass |
| Proteininnhold | Kjeldahl Metode | Større enn eller lik 40 % | 42.3% | Pass |
| Totalt antall tallerkener | Tallerkentall | Mindre enn eller lik 10 000 CFU/g | 4300 CFU/g | Pass |
| Gjær og mugg | Tallerkentall | Mindre enn eller lik 100 CFU/g | <10 CFU/g | Pass |
| Koliforme bakterier | Tallerkentall | Mindre enn eller lik 30 CFU/g | <10 CFU/g | Pass |
| E. coli | Fraværstest | Negativ / 25g | Ikke oppdaget | Pass |
| Salmonella | Fraværstest | Negativ / 25g | Ikke oppdaget | Pass |
| Lead (Pb) | ICP-MS / ICP-OES | Mindre enn eller lik 5 mg/kg | 0,18 mg/kg | Pass |
| Arsen (As) | ICP-MS / ICP-OES | Mindre enn eller lik 3 mg/kg | 0,12 mg/kg | Pass |
Produksjonsprosess
